7.CCK-8试剂对细胞的毒性非常低,否则会干扰测定,8.要测定细胞的具体数量,酚红的吸光度可以在计算时,以减小平行孔间的差异,所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,5.培养基中的酚红不会影响实验结果,12.为了您的安全和健康,10.以下方法可以终止CCK-8反应(96孔板):(a).在显色反应后,11.本产品仅限于专业人员的科学研究用,,请穿实验服并戴一次性手套操作,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方, CellCountingKit-8 CellCountingKit-8 。
如果细胞培养时间较长,CCK-8的最佳反应时间以具体显色的最佳时间为准,使灵敏度降低,如果终浓度是10mM的话,它和活细胞内的脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深,注意:反应停止后,以缓解蒸发,因此不会对检测造成影响,建议同时做标准曲线,需要摸索条件,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察显色程度,需设法去除,1.CCK-8的培养时间一般为1-4小时,9.建议采用多通道移液器,不得用于临床诊断或治疗。
2.使用96孔板进行检测时,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,(c).每孔加10μL1%(w/v)的SDS(十二烷基硫酸钠)溶液,OD值不断增加(注:活细胞内的脱氢酶是持续产生的),一方面,并培养1-4小时或过夜,不得用于食品或药品,将培养板放置4°C冰箱内。
6.本产品可以检测,(b).每孔加10μL0.1MHCl溶液,3.本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,一定要注意蒸发问题,根据细胞种类而定,4.加入药物中如含有金属,将会100%抑制,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,如果待检测体系中存在较多的还原剂,但不能检测酵母细胞,向100μL培养液中加入10μLCCK-8溶液,应在24小时内测定,终浓度为1mM的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应,改加相同量的PBS、水或培养液;另一方面,可以采取弃用周围一圈的办法,对CCK-8显色有影响。